期刊简介

  本学报是以反映首都医科大学各院、系、所及10任所附属、教学医院的科研成果为主的高级综合性学术期刊。季刊,国内外公开发行。主要栏目有论著、经验介绍、技术·方法、综述等。


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  • 杂志名称:首都医科大学学报杂志
  • 主管单位:北京市教育委员会
  • 主办单位:首都医科大学
  • 国际刊号:1006-7795
  • 国内刊号:11-3662/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:全国优秀科技期刊三等奖(第二届)期刊收录:维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
首都医科大学学报杂志2018年第03期

膀胱平滑肌细胞乙酰胆碱M3受体干扰RNA慢病毒载体的构建

尚振华;贾春松;颜灏;王巨昆;王旭;崔波;王琦;欧彤文

关键词:神经源性膀胱, M3型乙酰胆碱受体, 慢病毒载体, RNA干扰
摘要:目的 构建膀胱平滑肌细胞(bladderSmoothmusclecllS,BSMCS)M3型受体干扰RNA慢病毒载体.方法 合成4条M3受体干扰序列,构建GV118-Sh-M3慢病毒载体,测序验证序列.将GV118-sh-M3慢病毒载体与质粒pHelperl.0、pHelper 2.0三个载体共转染293T细胞,收集病毒颗粒并用荧光法检测4组病毒滴度.体外原代培养BSMCs,4组GV118-sh-M3慢病毒(KD1、KD2、KD3和KD4)转染BSMCs,观察绿色荧光蛋白表达并通过RT-PCR、Western blotting法检测各组干扰效率.结果 成功构建4个GV118-sh-M3慢病毒载体,测序结果符合设计序列.4组GV118-sh-M3慢病毒滴度分别为2 × 108、6 × 108、5 × 108和5 × 108TU/mL.分别转染BSMCs后,KD1组绿色荧光蛋白表达量高且干扰效率高.结论 成功包装并筛选了 GV118-sh-M3慢病毒载体,为后续进一步研究干扰M3受体在神经源性膀胱中的作用奠定了基础.