期刊简介

  本学报是以反映首都医科大学各院、系、所及10任所附属、教学医院的科研成果为主的高级综合性学术期刊。季刊,国内外公开发行。主要栏目有论著、经验介绍、技术·方法、综述等。


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  • 杂志名称:首都医科大学学报杂志
  • 主管单位:北京市教育委员会
  • 主办单位:首都医科大学
  • 国际刊号:1006-7795
  • 国内刊号:11-3662/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:全国优秀科技期刊三等奖(第二届)期刊收录:维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
首都医科大学学报杂志2015年第01期

外源性硫化氢对肝癌细胞系HepG2自噬的影响

陈宁;王珊珊;陈玉涵;殷继明;陈德喜;丁惠国

关键词:硫化氢, 自噬, 自噬蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅱ, 凋亡
摘要:目的:探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2 S)对肝癌细胞系HepG2细胞自噬的影响及其机制。方法应用外源性H2 S供体———硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)处理HepG2细胞,采用Western blotting方法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)表达变化,Real-time PCR方法检测自噬相关基因beclin1和atg5的mRNA表达浓度,免疫荧光方法观察HepG2细胞自噬颗粒变化、凋亡相关蛋白M30及凋亡小体变化,AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果瞬时转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)-LC3质粒后,发现NaHS处理组HepG2细胞内GFP-LC3Ⅱ绿色荧光斑点明显增加,M30阳性细胞率[(8.37±1.03)%],与对照组[(2.14±0.69)%]比较差异有统计学意义(P<0.05);同时,高倍镜下观察结果显示,NaHS处理后细胞核异染色质明显增加,凋亡小体形成。AnnexinV-FITC/PI双染结果显示NaHS处理组细胞凋亡率高于对照组[(16.32±0.28)%vs(0.67±0.09)%],差异有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR显示NaHS可增加HepG2细胞beclin1和atg5 mRNA表达水平,LC3-Ⅱ表达明显增加。且自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)可降低NaHS所致的beclin1和atg5的mRNA表达。结论外源性硫化氢能够上调自噬相关基因beclin1和atg5表达,进而促进HepG2细胞发生自噬,并诱导细胞凋亡。